【佳學(xué)基因檢測(cè)】分子診斷與基因檢測(cè)中各種不同的PCR技術(shù)

1.遞減PCR（touchdown PCR）：前幾循環(huán)溫度逐漸下降。

2.逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）：以由mRNA逆轉(zhuǎn)錄而來的cDNA 為模板，也因?yàn)槭菑谋憩F(xiàn)型基因來進(jìn)行增量的，由此產(chǎn)生出來的cDNA 產(chǎn)物不帶有內(nèi)含子（基因中不具意義的段落），常應(yīng)用于分子克隆技術(shù)。

3.熱啟動(dòng)PCR（hotstart PCR）：以高熱激活型核酸聚合酶進(jìn)行反應(yīng)，減少非專一性產(chǎn)物。

4.巢式PCR（nested PCR）：先用低特異性引物擴(kuò)增幾個(gè)循環(huán)以增加模板數(shù)量，再用高特異性引物擴(kuò)增。

5.多重PCR（multiplex PCR）：在同一個(gè)管中使用多組引物。

6.復(fù)原條件PCR（reconditioning PCR）：PCR 產(chǎn)物稀釋 10 倍后重新放入原濃度的引物和dNTP 等循環(huán) 3 次，以消除產(chǎn)物中的異二聚體。

7.dsRNA 合成（dsRNA replicator）：合并使用high-fidelity DNA polymersae、T7RNA聚合酶與Phi6 RNA replicase；從雙股 DNA轉(zhuǎn)錄為對(duì)應(yīng)的雙股RNA（dsRNA）。可應(yīng)用于RNAi實(shí)驗(yàn)操作。

8.COLD-PCR (co-amplification at lower denaturation temperature PCR):用以檢測(cè)突變或特殊等位基因的PCR 應(yīng)用技術(shù)。