【佳學(xué)基因檢測(cè)】胰腺癌液體活檢基因檢測(cè)之循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)

1869年，Ashworth報(bào)道了外周血中循環(huán)細(xì)胞的存在，類似于轉(zhuǎn)移性癌癥患者腫瘤中發(fā)現(xiàn)的循環(huán)細(xì)胞。盡管有這一發(fā)現(xiàn)，循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)在一個(gè)多世紀(jì)以來(lái)一直被忽視，直到賊近，循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)重新引起了科學(xué)家們對(duì)其臨床應(yīng)用的關(guān)注。循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)是在原發(fā)性腫瘤中發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）的惡性細(xì)胞。這些細(xì)胞在全身循環(huán)并滲透到淋巴管和血管中，可能導(dǎo)致轉(zhuǎn)移。EMT是癌癥發(fā)生和發(fā)展的關(guān)鍵過(guò)程。賊初，循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)保留了其來(lái)源的上皮細(xì)胞的特征，隨著EMT的進(jìn)展，循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)經(jīng)歷了各種表型變化，避免了細(xì)胞凋亡并促進(jìn)了轉(zhuǎn)移。值得注意的是，循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)上表達(dá)的上皮細(xì)胞粘附（EpCAM）和細(xì)胞角蛋白（CK）等分子可以在EMT過(guò)程中發(fā)生變化，增強(qiáng)其遷移和侵襲能力。

從數(shù)以百萬(wàn)計(jì)的血細(xì)胞中提取循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)是一項(xiàng)巨大的挑戰(zhàn)，因?yàn)樵谡麄€(gè)分離過(guò)程中必須防止循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)的任何損傷或損失。為了應(yīng)對(duì)這一挑戰(zhàn)，人們使用了各種技術(shù)，包括針對(duì)腫瘤細(xì)胞表面特定抗原的免疫親和方法、微流體捕獲裝置和基于大小的分離方法。免疫親和方法包括通過(guò)上皮細(xì)胞標(biāo)記物（如EpCAM或CK）進(jìn)行陽(yáng)性富集，以及通過(guò)CD45進(jìn)行陰性富集以消除白細(xì)胞?；谖锢硇再|(zhì)的方法包括基于尺寸排阻色譜的密度梯度離心。有時(shí)，采用基于循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)物理和生物特性的技術(shù)的協(xié)同方法用于其分離。

即使在腫瘤形成之前，血液中確實(shí)可以檢測(cè)到胰腺細(xì)胞。與健康個(gè)體相比，這些細(xì)胞在33%的囊性病變患者和73%的胰腺癌患者中可檢測(cè)到。此外，其他研究已注意到循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)在不同比例的良性、癌前或惡性病變中存在，但在健康對(duì)照組中不存在。

然而，循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)的診斷功效一直是研究人員爭(zhēng)論的話題，因?yàn)樗鼈兊撵`敏度不一致，范圍從21%到100%。在Ankeni及其同事的一項(xiàng)研究中，采用NanoVelcro CTCs微流體芯片分析了來(lái)自預(yù)處理PDAC患者的100個(gè)連續(xù)樣本。結(jié)果顯示，在72例確診的PDAC患者中，有54例有CTC，表明用于診斷目的時(shí)，靈敏度為75%，特異性為96.4%。

鑒于檢測(cè)CTC的技術(shù)差異，一些研究人員建議將CTC檢測(cè)與其他生物標(biāo)志物相結(jié)合，以提高靈敏度至100%，特異性至80%。盡管CTC的特異性低于EV，但它們的利用在PDAC檢測(cè)中仍具有相當(dāng)大的診斷潛力。

胰腺癌的液體活檢基因檢測(cè)中，循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）是一項(xiàng)重要的檢測(cè)指標(biāo)。CTCs是指從實(shí)體腫瘤中脫落并進(jìn)入外周血液循環(huán)的腫瘤細(xì)胞，這些細(xì)胞逃離了宿主免疫殺傷而存活下來(lái)。盡管CTCs的數(shù)量極少，但它們的存在為形成遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶提供了可能。

胰腺癌患者的循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)含有胰腺癌的標(biāo)志性基因K-Ras的突變。此外，循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)的數(shù)量與胰腺癌的轉(zhuǎn)移和病情發(fā)展程度存在一定的相關(guān)性。因此，通過(guò)檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC)，可以實(shí)時(shí)、正確地評(píng)估胰腺癌患者的病情狀態(tài)，為臨床診斷和治療提供重要參考。

目前，已有多種FDA認(rèn)證的技術(shù)通過(guò)富集、純化等方法提高CTCs檢測(cè)的靈敏度和特異性，使其在臨床應(yīng)用上具有可行性。這些技術(shù)包括免疫熒光法（IF）、熒光原位雜交（FISH）、RT-PCR反轉(zhuǎn)錄PCR和二代測(cè)序等。其中，免疫熒光法是目前檢測(cè)CTCs的賊常見方法，可以識(shí)別來(lái)自實(shí)體瘤CTC中的瘤標(biāo)，但存在因間質(zhì)化（EMT）階段導(dǎo)致的大量CK降解而造成的假陰性問(wèn)題。熒光原位雜交和RT-PCR則可以檢測(cè)特異基因序列的存在與豐度，以及mRNA的表達(dá)情況。而二代測(cè)序則可以直接對(duì)CTCs的基因組進(jìn)行測(cè)序，但由于CTCs數(shù)量少，直接進(jìn)行二代測(cè)序難度較大。

總之，胰腺癌液體活檢基因檢測(cè)中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)是一項(xiàng)重要的技術(shù)手段，可以為胰腺癌的早期診斷、病情評(píng)估和治療方案制定提供重要參考。未來(lái)隨著技術(shù)的不斷發(fā)展和完善，相信CTCs檢測(cè)在胰腺癌的臨床應(yīng)用中將發(fā)揮更加重要的作用。
 

支持本文的科學(xué)文獻(xiàn)

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC10855073/