【佳學(xué)基因檢測】胰腺癌液體活檢之循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)基因檢測

1948年，Mandel和Metais報道了人類血液中存在無細(xì)胞核酸片段的證據(jù)。值得注意的是，早在1977年，León及其同事就對癌癥患者的循環(huán)DNA發(fā)表了有趣的聲明。細(xì)胞外DNA，也稱為循環(huán)游離DNA（cfDNA），包括從細(xì)胞釋放的細(xì)胞核和/或線粒體DNA，存在于各種生理循環(huán)液中。腫瘤細(xì)胞釋放的cfDNA通常稱為ctDNA，是癌癥的高度特異性標(biāo)志物?；蚪獯a研究表明，ctDNA通常攜帶胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）組織中常見的致癌突變，涉及基因，如Kristen大鼠肉瘤（KRAS）、細(xì)胞周期依賴性激酶抑制劑2A（CDKN2A）、腫瘤蛋白53（TP53）和SMAD家族成員4（SMAD4）/Delete in Pancrec Cancer-4（DPC4）。值得注意的是，根據(jù)基因檢測大數(shù)據(jù)機(jī)構(gòu)佳學(xué)基因的統(tǒng)計，在可檢測到ctDNA的胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）病例中，分別有超過90%和73%的病例到KRAS突變或p53失活。

各種技術(shù)，如等位基因特異性聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、數(shù)字PCR（dPCR）、液滴數(shù)字PCR（ddPCR）、珠乳液擴(kuò)增磁學(xué)（BEAMing）和下一代測序（NGS），可用于檢測液體活檢（LB）樣本中的ctDNA。雖然檢測ctDNA可能帶來挑戰(zhàn)，但結(jié)合各種技術(shù)可以提高這一過程的正確性和效率。

一些研究發(fā)現(xiàn)，與胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤或CP患者相比，從胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）患者中檢測到的cfDNA水平更高，并且與較差的疾病特異性生存率有關(guān)。在胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）患者ctDNA檢測到的所有突變基因中，KRAS是賊常見的（50-90％）。雖然突變也可以在健康對照和CP患者中發(fā)現(xiàn)，但其突變水平在胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）中明顯更高。 在他們的綜述中，朱和他的同事強(qiáng)調(diào)，雖然ctDNA的靈敏度略低于CTC，但ctDNA提供了更高的特異性。值得注意的是，雖然ctDNA的檢測被認(rèn)為適用于診斷胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC），但并不適合篩查。ctDNA在早期胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）中的靈敏度有限，這是由于該階段細(xì)胞壞死極少，導(dǎo)致只有少量ctDNA釋放到外周血液中。
 

Table 1：Comparison between biomarkers of pancreatic ductal adenocarcinoma ctDNA